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                ELISA实验指南(样本制备和常见问题)

                ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。通常可适用于测定细胞培养上清、血清、血浆「以及组织裂解物样品等。


                ELISA样本制备指南

                指南各种制备方法№适用于常规ELISA,样品的制备方法通常也会▃随测定靶标和检测▲方法而适当变化,在建立新的检测方法时,建议查阅相关文献或进行必要的流程优化。

                在收集样品前有必要建立完整的计划,必须清楚要检测的成份是否足够稳定,我们提倡新鲜样品尽早检▓测,对收集后当天就进行检测的标本及时储存在4℃备用。如有特殊原因需要周期性收集样品,在造模取材后,将标本及时分〓装后放在-20℃或-80℃条件◥下保存。因冰箱与室温存在一定温差,蛋白极易降解,直接↑影响实验质量,所以避免反复冻融。


                液体类型样品

                【细胞培养上清】

                将细胞培养基移至离心管,并在4℃条件下以1,500 rpm离心

                10min。立即等分◆上清液并于-80℃下保ζ存样品∩。尽可能减少样品冻融。


                【血清】

                室温血液∑自然凝固10~20min后,4℃条件下以3,000 rpm离心10min。立√即等分上清液并于-80℃下保存样品。保存过程中如有沉淀形成,应●再次离心。避免反复冻融∞样品。


                【血浆】

                将全血收集到含抗凝血剂的管中,根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或☉肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,在4℃条件下以3,000 rpm离心10分钟。立即等分上清液(血浆)并于-80℃下保存样品,避免♂反复冻融样品。


                【唾液】

                收集样品并在4℃下以10,000 x g离心2分钟。

                立即等分上清液并在-80℃下保存样品,避免反复冻融々样品。


                【尿液】

                用无菌管收集,并在 4℃下以10,000 x g离心2分钟。

                立即等分上清液并于-80℃下保存样品。避免反复冻融样↘品。


                组织样品

                采集组织(最好ω 在冰上操作,并应尽可能快以防止被蛋白酶降解

                )样品后,称取组织净』重,用液氮迅速冷冻保存备用。将样品保存在- 80℃下以便后续使用或放置在冰上进行直接匀浆。加入一定量的组织提取缓冲液,用手㊣ 工或匀浆器将样品匀浆充分。


                在4℃下以13000 rpm离心20分钟。置于冰上,将上清液(可溶的蛋白▆质提取物)等分至新的冷却管中并在-80℃下保存样品。避免反复冻◢融样品。


                ELISA常见问题解答




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                • 灵敏度高

                • 批间差小

                • 重复性佳


                    百瑞极ELISA试剂盒的所有生产环节均采用严苛的质量控制标准。从抗体对的筛选、酶标板的选择、包板、干板、样本稀释液中基质效应的控制、 酶底物筛选、试剂瓶防漏测试等环节均经过多重严格的监控▼,确保提供的每一个试剂盒具有最佳的性能和一←致性。

                    百瑞极所有ELISA试剂盒均为完整的、经过验证的即用型试剂盒,可用于定量检测多种复杂样本类型中的靶蛋白含量。试剂盒采用双抗夹心法免疫检测原理。

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